玉米抗病毒基因的挖掘与分子机制_刘青青_9787521923735

本书的内容大致分为7章：第1章为绪论，概述了包括玉米矮花叶病和玉米致死性坏死病在内的玉米病毒病的研究，总结了植物抗病和植物抗病毒分子机制的研究进展，对植物硫氧还蛋白研究成果进行了阐述，并归纳了玉米病毒病研究情况。第 2章为玉米矮花叶病抗病基因挖掘的主要内容。在前期对玉米矮花叶病抗病位点定位的基础上，利用两个n代重组自交系进一步对玉米矮花叶病主效抗病位点进行精细定位。并对候选区段内的候选基因进行了预测和确定。第3章为硫氧还蛋白编码基因的克隆与序列特征分析，扩增硫氧还蛋白编码基因的DNA和全长cDNA片段并测序获得序列信息，利用生物信息学对其序列特征进行分析。第4章为硫氧还蛋白基因介导玉米矮花叶病抗性分析，利用转基因互补测验对玉米矮花叶病抗病候选基因ZmTrxh进行了功能验证，构建RNA干扰载体用于后续抗病基因的功能验证和分析。第5章为硫氧还蛋白介导的抗玉米矮花叶病分子机理，通过在玉米原生质体瞬时表达系统中，过表达 ZmTrxh研究硫氧还蛋白在原生质体瞬时表达系统中对甘蔗花叶病毒RNA复制积累的影响，利用洋葱表皮和玉米原生质瞬时表达系统分析了抗病毒蛋白ZmTrxh的亚细胞定位情况。第6章为硫氧还蛋白介导的玉米致死性坏死病抗性的研究，进行了玉米致死性坏死病抗性种质资源收集与筛选，对引入玉米矮花叶病抗病位点． ScmvJ的玉米材料进行了抗性鉴定。分析了硫氧还蛋白对玉米致死性坏死病的抗性效应。第7章对全书进行了总结与展望。

第1章绪论 1.1 玉米矮花叶病研究进展 1.1.1 病症、危害及防治 1.1.2 致病病原及其生物学特性 1.1.3 抗病种质筛选与抗性遗传 1.1.4 结论 1.2 玉米致死性坏死病研究进展 1.2.1 病症、危害及防治 1.2.2 致病病原及其生物学特性 1.2.3 抗病种质筛选与抗性遗传 1.2.4 结论 1.3 植物抗病研究进展 1.3.1 植物抗病尺基因 1.3.2 植物数量抗性位点 1.3.3 植物抗病机理 1.4 植物抗病毒分子机制研究进展 1.4.1 植物RNA沉默介导的抗病机制 1.4.2 植物隐性基因介导的抗病机制 1.4.3 植物显性基因介导的抗病机制 1.5 植物硫氧还蛋白研究进展 1.5.1 植物中H型硫氧还蛋白的分类 1.5.2 植物中H型硫氧还蛋白的多重性与亚细胞定位 1.5.3 植物中H型硫氧还蛋白的氧化还原涪陛 1.5.4 植物中H型硫氧还蛋白的分子伴侣沿陛 1.5.5 植物中H型硫氧还蛋白的信号分子功能 1.5.6 H型硫氧还蛋白与植物抗病 1.6 玉米病毒病研究总结第2章玉米抗矮花叶病基因挖掘 2.1 材料 2.1.1 玉米材料 2.1.2 接种病原物 2.2 研究方法 2.2.1 人工接种病毒与表型鉴定 2.2.2 分子标记开发 2.2.3 基因型鉴定 2.2.4 BAC文库筛选及覆盖Scmvl的BAC重叠群构建 2.2.5 BAC序列分析与候选基因预测 2.2.6 候选基因表达的半定量检测 2.3 结果与分析 2.3.1 两个F6代重组自交系群体中Scmvl区段的验证 2.3.2 利用两个F6代重组自交系群体进一步精细定位 2.3.3 BAC文库筛选及覆盖Scmvl区段的BAC重叠群构建 2.3.4 候选基因的预测 2.3.5 候选基因的确定 2.4 结论与讨论第3章硫氧还蛋白编码基因的克隆与序列特征分析 3.1 玉米材料与主要试剂 3.1.1 玉米材料 3.1.2 主要试剂 3.2 研究方法 3.2.1 玉米叶片总DNA提取 3.2.2 玉米叶片总RNA提取 3.2.3 硫氧还蛋白编码基因的DNA及cDNA片段扩增引物设计 3.2.4 硫氧还蛋白编码基因DNA片段的PCR扩增 3.2.5 硫氧还蛋白编码基因的全长cDNA获得 3.2.6 硫氧还蛋白编码基因的生物信息学分析 3.3 结果与分析 3.3.1 玉米抗病自交系叶片组织总cDNA及RNA的提取 3.3.2 硫氧还蛋白编码基因DNA及cDNA扩增引物 3.3.3 硫氧还蛋白编码基因的DNA及全长cDNA扩增 3.3.4 硫氧还蛋白编码基因的生物信息学分析 3.4 结论与讨论第4章硫氧还蛋白基因介导玉米矮花叶病抗性 4.1 材料与试剂 4.1.1 玉米材料 4.1.2 载体、菌株及主要试剂 4.2 研究方法 4.2.1 互补载体的构建与转化 4.2.2 互补转基因植株的基因型及抗性鉴定 4.2.3 RNA干扰载体的构建与转化 4.3 结果与分析 4.3.1 BAC克隆及互补载体的大量酶切 4.3.2 互补表达载体的构建及验证 4.3.3 互补表达载体重组质粒的鉴定 4.3.4 互补转基因植株的获得及功能互补验证 4.3.5 RNA干扰载体的构建与转化 4.4 结论与讨论第5章硫氧还蛋白介导的抗玉米矮花叶病分子机理 5.1 材料及试剂 5.1.1 玉米材料 5.1.2 载体及主要试剂 5.2 研究方法 5.2.1 亚细胞定位所需溶液配制 5.2.2 亚细胞定位载体的构建 5.2.3 亚细胞定位步骤 5.2.4 SCMV病毒粒子及RNA提取 5.2.5 玉米原生质体瞬时表达系统建立 5.3 结果与分析 5.3.1 硫氧还蛋白的亚细胞定位 5.3.2 ZmTrxh瞬时过量表达对SCMVRNA的影响 5.4 结论与讨论第6章硫氧还蛋白基因介导的玉米致死性坏死病抗性效应 6.1 材料及主要试剂 6.1.1 玉米材料 6.1.2 接种病原及主要试剂仪器 6.2 研究方法 6.2.1 抗性材料筛选及优势类群的划分 6.2.2 玉米自交系中硫氧还蛋白编码基因的鉴定及抗性表现 6.2.3 硫氧还蛋白介导的玉米致死性坏死病抗性分析 6.3 结果与分析 6.3.1 抗性种质资源收集与筛选 6.3.2 有无QTL-Scmvl抗病位点对抗性影响的鉴定 6.3.3 引入QTL-Scmvl抗病位点的玉米新材料创制 6.3.4 引入QTL-Scmvl抗病位点的玉米新材料的抗性鉴定 6.3.5 玉米致死性坏死病病级划分及抗病评价 6.4 结论与讨论第7章总结和展望 7.1 总结 7.1.1 玉米矮花叶病抗病基因挖掘 7.1.2 硫氧还蛋白编码基因的克隆及序列特性分析 7.1.3 硫氧还蛋白基因介导玉米矮花叶病抗性 7.1.4 硫氧还蛋白介导的玉米矮花叶病抗病分子机制 7.1.5 硫氧还蛋白基因介导玉米致死性坏死病抗性的分析 7.2 展望参考文献附表本研究所使用的引物信息

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