医学细胞生物学的理论和技术是医学科学知识结构的重要组成部分。本教材涵盖了细胞生物学常用实验技术中与基础和临床医学关系密切的内容，设基本实验和综合实验上下两篇。上篇为基本实验，对每个基本实验的目的、基本原理、操作流程和实验结果作了比较详细的介绍；而下篇则根据学科的进展和未来发展趋势，结合自身的教学和科研体验，归纳出可操作性较强，体现出学科间交叉渗透特点的综合实验。因此，本教材既可以作为学生的教科书，也能成为他们日后的实验参考书。
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目录
上篇 基本实验
第一章 显微镜的构造和使用 1
实验1-1 普通光学显微镜的构造、使用方法及细胞基本形态结构的观察 1
实验1-2 倒置相差显微镜的构造与使用 5
实验1-3 显微镜测微尺的使用 8
第二章 流式细胞仪技术与应用 14
实验2-1 流式细胞仪结构原理及应用 14
实验2-2 流式细胞仪检测细胞周期 18
实验2-3 流式细胞仪检测细胞凋亡 19
实验2-4 流式细胞仪检测细胞中抗原——流式细胞术检测T淋巴细胞亚群 21
第三章 细胞器结构的观察与分离 24
实验3-1 细胞器结构的观察 24
实验3-2 细胞器分级分离 31
第四章 细胞化学方法和细胞化学成分显示 34
实验4-1 细胞化学基本理论 34
实验4-2 细胞中骨架蛋白的显示与细胞形态的观察 37
实验4-3 Feulgen法显示脱氧核糖核酸 39
实验4-4 甲基绿-派洛宁显示核酸 41
实验4-5 苏木素-伊红染色显示细胞核和细胞质 42
第五章 酶细胞化学 45
实验5-1 酶细胞化学的基本原理 45
实验5-2 碱性磷酸酶显示及用途 47
实验5-3 联苯胺法显示过氧化物酶及应用 49
实验5-4 詹纳斯绿显示活体细胞线粒体 50
实验5-5 利用琥珀酸脱氢酶活性进行MTT检测细胞相对存活率 51
实验5-6 CCK8检测技术 53
第六章 免疫化学技术 56
实验6-1 免疫酶细胞化学法检测髓母细胞瘤细胞系中P65蛋白的表达 56
实验6-2 免疫荧光染色显示髓母细胞瘤细胞系中HES1蛋白的分布 58
实验6-3 免疫组织化学法检测HES1在胃癌组织中的表达与分布 60
第七章 细胞遗传学技术 64
实验7-1 人类性染色质标本的制备与观察 64
实验7-2 人外周血淋巴细胞培养与染色体制备 66
实验7-3 小鼠骨髓细胞染色体标本的制备与观察 69
实验7-4 染色体G显带技术 70
实验7-5 核型分析 74
第八章 细胞培养技术 77
实验8-1 细胞培养的基本原理与技术 77
实验8-2 细胞的原代培养 84
实验8-3 传代细胞培养 85
实验8-4 培养细胞的形态观察和计数 87
实验8-5 细胞冻存、复苏与运输 90
实验8-6 细胞克隆化培养 92
实验8-7 细胞三维培养 94
第九章 细胞行为学 99
实验9-1 细胞吞噬实验 99
实验9-2 细胞融合实验 101
实验9-3 细胞周期 106
实验9-4 小鼠减数分裂 109
实验9-5 细胞周期特定时相细胞同步化方法 113
实验9-6 细胞运动的观察 116
实验9-7 肿瘤细胞的迁移和侵袭试验——Transwell小室测定法 118
第十章 细胞衰老和凋亡的检测 120
实验10-1 苏木素-伊红染色法显示凋亡细胞 120
实验10-2 Giemsa染色法显示凋亡细胞 122
实验10-3 凋亡细胞的原位末端转移酶标记法（TUNEL法） 123
实验10-4 细胞凋亡的琼脂糖凝胶电泳检测 125
实验10-5 细胞衰老的检测 127
第十一章 蛋白质的分离与测定 129
实验11-1 真核细胞蛋白质提取 129
实验11-2 双缩脲法测定蛋白质浓度 131
实验11-3 福林-酚法测定蛋白质浓度 132
实验11-4 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度 134
实验11-5 蛋白质印迹免疫分析（Western blot） 135
第十二章 核酸的分离、测定与分析 139
实验12-1 真核生物组织及细胞基因组DNA提取 139
实验12-2 组织及细胞中RNA的提取 140
实验12-3 DNA与RNA含量测定 142
实验12-4 聚合酶链反应技术（PCR）体外扩增DNA片段 143
实验12-5 反转录聚合酶链反应（RT-PCR） 145
实验12-6 实时定量PCR（Real time-PCR） 148
下篇 综合实验
第十三章 小鼠胚胎干细胞培养 152
实验13-1 小鼠胚胎成纤维细胞的培养 152
实验13-2 饲养层细胞的制备 154
实验13-3 小鼠胚胎干细胞的分离及培养 155
第十四章 IL-6剥夺诱导小鼠B细胞杂交瘤细胞系7TD1细胞凋亡、观察及检测 157
实验14-1 小鼠B细胞杂交瘤细胞系7TD1细胞复苏与传代培养 158
实验14-2 7TD1细胞的凋亡诱导（IL-6剥夺）及细胞收集 160
实验14-3 IL-6剥夺诱导7TD1细胞凋亡的形态特征观察 161
实验14-4 IL-6剥夺诱导7TD1细胞凋亡的DNA提取及凋亡梯状带检测 164
第十五章 观察白藜芦醇对髓母细胞瘤细胞分化、运动、凋亡的影响及相关基因的检测 168
实验15-1 细胞的培养与传代 168
实验15-2 白藜芦醇处理前后细胞数量和形态的观察以及免疫细胞化学染色 170
实验15-3 白藜芦醇对髓母细胞瘤细胞迁移能力的影响 172
实验15-4 总RNA提取和分化相关基因突触素（synaptophysin）的RT-PCR检测 173
第十六章 小鼠表皮细胞原代培养及免疫荧光检测 175
实验16-1 细胞原代培养（消化法） 175
实验16-2 细胞传代 176
实验16-3 细胞的处理及免疫荧光法检测E-cadherin 177
实验16-4 细胞的显微摄影 179
第十七章 应用基因重组技术在真核细胞中表达和检测p53基因 182
实验17-1 目的基因p53 PCR扩增及琼脂糖凝胶电泳检测 183
实验17-2 目的基因p53片段纯化回收与重组表达载体连接、转化、筛选及重组质粒提取 184
实验17-3 培养细胞转染目的基因表达载体 187
实验17-4 Western blot方法检测外源目的基因p53表达 188
附录 191
附录一 试剂浓度的表示方法及其计算 191
附录二 常用人工合成细胞培养基的种类、化学组成及适用细胞 193
附录三 实验室常用细胞系（株） 196
附录四 离心机转数与离心力的换算表 199
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